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按這個步驟操作牛ELISA檢測試劑盒,簡單易懂

發(fā)布時間:2021-12-23   點(diǎn)擊次數(shù):1396次
  牛ELISA檢測試劑盒主要用于測定血清、血漿、組織和相關(guān)液體樣本中的含量或者活性,剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實(shí)驗結(jié)果造成任何影響,您可放心使用。
 
  實(shí)驗原理:
  牛ELISA檢測試劑盒采用夾心酶免法,采用了兩種高特異性抗體,TMB作為著色劑,最終溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中指標(biāo)的量成正比。
 
  特別注意:
  1、樣品采集后應(yīng)立即檢測,如需貯存的,則應(yīng)放置在冰凍條件下,避免反復(fù)凍融,檢測前應(yīng)在低溫下將其溶解并*混合;
  2、如有需要,樣品可用EIA緩沖液稀釋;
  3、建議試驗樣品和標(biāo)準(zhǔn)品做雙份檢測;
  4、試驗樣品應(yīng)在中性PH范圍內(nèi),有機(jī)溶劑的污染會影響試驗;
  5、只能使用試劑盒內(nèi)提供的洗滌液洗板,洗板不充足可能會導(dǎo)致試驗失??;
  6、*倒去洗滌液,吸水紙上拍干,不能用吸水紙擦拭微孔;
  7、底物液應(yīng)避光保存,因其對光敏感,且要避免接觸金屬;
  8、加入終止液后30min內(nèi)讀數(shù)。
 
  牛ELISA檢測試劑盒操作步驟:
  1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃;
  2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
  3、樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加;
  4、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min;
  5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次;
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min;
  7、每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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